| 搖瓶機培養(yǎng)方法在浸沒培養(yǎng)過程中振蕩的目的在于改善活細胞的氧氣和營養(yǎng)物的供給。培養(yǎng)通常以特定生長條件下的培養(yǎng)物接種，也可用孢子接種。在絕大多數(shù)情況下，接種量有一較佳濃度，此在開始之前，須通過預試加以確定。而在整個搖瓶發(fā)酵過程中保持相對無菌是成功地實施這項技術(shù)的必要保證。 搖瓶機培養(yǎng)的機械裝置主要由用于放置和固定燒瓶的平臺以及牽引其運轉(zhuǎn)的馬達和運轉(zhuǎn)系統(tǒng)組成，需安裝于有維持恒溫和恒濕自動調(diào)節(jié)能力的隔熱室內(nèi)。 目前也有具備恒溫裝置的小型臺式搖床。 搖床的設(shè)計和使用性能主要從下列幾項入手：(1)所使用的設(shè)備，(2)平衡要求，(3)搖床的大小、型號，(4)培養(yǎng)條件及恒溫調(diào)控，(5)試管或小型發(fā)酵器的振蕩培養(yǎng)性能。 搖瓶機細菌培養(yǎng)試驗步驟： 1、復蘇：根據(jù)所培養(yǎng)的細菌選擇適宜的培養(yǎng)基，大部分細菌在LB培養(yǎng)基中在超凈工作臺先用1毫升左右的適宜的培養(yǎng)基溶解冷凍菌，然后轉(zhuǎn)移到10毫升中試管(放入4毫升液體培養(yǎng)基)中，一般在37攝氏度搖床靜止或低轉(zhuǎn)速培養(yǎng)12小時或者過夜(溫度取決于所培養(yǎng)的細菌適宜生長的溫度)。 2、平板劃線培養(yǎng)：在平板(瓊脂+液體培養(yǎng)基)劃線，放37攝氏度培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)6小時~12小時，在平板上觀察是否形成了單菌落. 3、挑單菌落：在超凈臺中挑選典型單菌落，置入10毫升中試管(內(nèi)有5毫升液體培養(yǎng)基)中，在37攝氏度搖床，轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)培養(yǎng)12小時或者過夜，肉眼能看到試管渾濁。 4、按照1:20的比例將中試管中的菌液移到250毫升三角瓶,培養(yǎng)條件同前。 |
